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司空见惯未必真了解:移液器的正确使用与日常维护

点击次数:59  发布时间:2021-07-20

/// 移液器的正确使用与维护,保证精确移液的日常操作!

实验室天天见的移液器,握在手里时那熟悉的触感,加液移液时一气呵成的操作,这个feel简直了,就是科研咖们的“倍爽儿"!越是最司空见惯的东西,未必就是我们最了解的。看似简单的移液器,却是陪伴科研咖们实验生涯最久的伴侣,值得我们去学习如何正确使用和保养它,才可维持住这一份实验室的“长情"!


1 移液器正确使用

01 量程调节


量程的设定原则:由大到小!

  • 1)当由小量程到大量程时:

  • 2)朝所需量程方向连贯旋转

  • 3)旋转到达超过所需量程1/3圈处

  • 4)回调到所需量程处

Tips:正确的量程设定可以提高0.5%的移液准确性!IKA移液器具有量程安全锁,待调节到所需体积后,按下量程安全锁,体积即被锁定,在移液过程中可以有效防止量程“漂移"。

02 安装吸头

正确操作:
移液器套柄用力下压并小幅度旋转即可

错误操作:
用力敲击吸头。(此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性)

Tips:规范的移液操作可能带来0.1%到5%的移液误差,甚至更高!

03 润洗吸头


用同一样品对吸头进行润洗
先吸取样品,然后排回样品池或废液槽
润洗有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性
注意:高温或低温液体不要润洗吸头!

Tips:润洗吸头可提高0.5%的移液准确性!

04 吸液的正确操作

保持平顺,控制好吸液速度
过快的吸液速度,会导致:

  • 1)样品液进入套柄

  • 2)对活塞和密封圈造成损伤

  • 3)带入气雾

  • 4)造成样品交叉污染


Tips:不正确的吸液速度会导致至少5%的准确性下降! IKA 移液器的机身重量很轻,适合于长时的移液操作。对于分相液体需要吸取特定层的样品时,必须控制好手速,缓慢释放移液轴,避免吸取到非特定层的物质。

05 吸液的正确姿势

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                                                                            正确的吸头浸入角度

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                                                                             错误的吸头浸入角度

Tips:以正确角度进行吸液操作可提高0.5%的移液准确性 (微量程移液器可达 2.5%)

06 排液

先将排液按钮按至第一档(排液档),略作停顿以后,再按至第二档(吹液档)
常规排液操作:

  • 1)沿容器内壁排液(常规)

  • 2)直接排入液面下

  • 3)在液面上方排液


Tips:正确的排液技术提高1%的移液准确性!

07 高黏及易产生气泡样品的移液策略

反向移液技术:
将排液按钮按至第二档
将吸头浸入液面至少1mm,吸取液体
排出液体时,将排液按钮按至第一档
残存在吸头内的液体可以排出到原瓶或者弃掉


2 移液器的日常维护

01 移液器归位

当天用完应调回最大量程,放置于移液器支架或实验台挂钩上。

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02 移液器的清洁

A. 外部清洁
移液器外壳清洁,可先用日常清洁剂(肥皂液,洗洁精等)擦洗,然后用双蒸水擦净晾干即可。

B. 内部清洁
移液器内部清洁,先将移液器下半部分拆卸下来,其中塑料部件采用与外部清洁一致的方式即可;活塞清洁可用双蒸水(或先用异丙醇冲洗再用双蒸水洗净),晾干即可(需要涂密封油脂的移液器还需要涂上密封油脂)。

Tips:移液器枪体密封部分,大多是免维护的,不能轻易拆卸。

03 移液器的消毒灭菌

A. 常规的高温高压灭菌处理
用灭菌袋或牛皮纸等材料包装移液器灭菌部件,121°C,1BAR,20分钟,灭菌完毕室温下完全晾干后再组装。

B. UV紫外照射进行表面灭菌消毒
Tips:IKA的移液器允许整支消毒灭菌。实验者也可徒手拆卸开移液器的下半部分进行部分消毒灭菌的处理。

04 移液器的气密性检查

绝大部分移液器不准是由于移液器漏气造成,造成移液器漏气的原因很多,像吸头质量、吸头匹配性、吸头安装是否紧密、移液器本身漏气等。当怀疑移液器本身漏气时,可通过以下方法进行检查:

A. 简单目视检测法(适合用户自行检测)
取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水。
如果是200ul以下的移液器,请将吸头浸入液面1-2毫米,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降,如果下降了,就说明您手中的移液器出现了漏气的情况;
如果是1000ul以上的移液器,请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴,如果有,说明您手中的移液器也出现了漏气的情况 

Tips:如移液器本身密封性不好,需更换活塞或密封圈。

B. 专业压力泵检测
需使用专业压力泵进行检测。
 

05 移液器校准

需要在特定的环境条件(温度、湿度等)及具备相应硬件(如高精密度的天平)的实验室中进行,客户一般只能粗略进行自测(IKA的移液器上有一个校调按钮,若发现量程不准,可人工按下此按钮,进行移液器校调)。需严格校准则需由厂家进行校准。
Tips:IKA 可为购买IKA移液器的客户提供校准服务(收费项目),出具符合CNAS要求的校准报告。

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